产品信息

产品描述

支原体污染是细胞培养领域的世界性问题，世界各国的细胞支原体污染平均比例为30~60%。支原体直径约为 0.1~0.3μm，具有变形能力，可透过常见过滤膜（0.22~0.45μm），因此常规的无菌过滤方法不能将其去除，常用的抗生素也对支原体无效。

支原体可通过细胞之间交叉污染，操作人员的口腔、皮肤造成污染、血清等添加物而带入污染。由于支原体无法通过常规的光学显微镜观察到，不会引起培养基混浊，因此细胞被支原体污染一般难以察觉。

支原体会消耗必须氨基酸，影响细胞生长速率，造成代谢物累积，改变细胞形态，影响DNA、RNA、蛋白质的合成，抑制细胞因子表达，改变被污染细胞的基因表达谱，诱导染色体畸变。

iCell支原体清除剂plus经过了上百种细胞的测试和长期的实验验证，能以较低的浓度杀灭支原体，适合支原体久杀不净、污染耐药支原体、污染多种类支原体、污染特殊类型支原体、支原体反复复发的细胞。本产品仅12小时就可以显著抑制支原体生长，1~2周左右即可清除支原体污染，且不影响细胞本身的代谢，完美兼具特异性和高效清除支原体的特点，特别适合细胞株/系中顽固和特殊类型支原体的清除，最大程度上挽救您的珍贵细胞。

使用方法

从4～8℃冰箱内取出支原体清除剂plus，将试剂管瞬时离心（3000rpm，3~5s）后放置于EP管架上，用75%的酒精喷洒试剂管的表面，在生物安全柜中进行无菌操作；

以T25细胞培养瓶为例

清除支原体污染操作规程

对于支原体污染较轻或细胞较为脆弱的，如胚胎干细胞（H1、H9、iPS），建议采用2000×浓度清除支原体，如：6mL的完全培养基加入3μL的支原体清除剂plus混匀。

若支原体污染较严重，可酌情增加药物浓度以提高清除支原体的效率，推荐采用1000×浓度清除支原体，如：6mL的完全培养基加入6μL的支原体清除剂plus混匀。

连续加药培养1~2周（或传代3次）后，检测是否还存在支原体污染。如果还存在支原体污染，可继续培养1周。

注意：

① 贴壁细胞换液或传代前，弃去旧的培养基，用PBS轻轻冲洗细胞表面2次。

② 若细胞达到可传代比例，请及时传代并铺入新的细胞培养瓶，换新瓶的过程也可有效规避培养瓶壁上残留支原体的污染；

③ PCR检测支原体清除干净后，必须进行传代并铺入新的细胞培养瓶，且在新瓶中加药维持1~2天后，才可以撤掉支原体清除剂plus，避免在旧瓶中撤药后旧瓶壁上的支原体残留造成二次污染；

预防支原体污染操作规程

若细胞需长时间培养或存在共用液氮罐的情况，建议每2~3周进行定期预防。在细胞培养基中加入适量支原体清除剂plus，通常推荐使用的稀释倍数为3000×，如：6mL的完全培养基加入2μL的支原体清除剂plus混匀。连续加药培养1~2周，即可有效防止支原体污染或抑制支原体增殖。

注意：由于胚胎干细胞（H1、H9、iPS）较为脆弱，建议采用5000×浓度预防支原体。

质量控制

R 通过支原体、真菌、支原体、内毒素检测。

R 通过渗透压、pH 检测。

R 通过产品性能检测。

运输与保存方法

冰袋运输；

4～8℃ 避光保存，保质期2年；

产品优势

ê高效性，12h即可有效抑制支原体的增殖；

ê高特异性，特异性清除支原体；

ê无耐药性，活性成分为多肽类，不会产生耐药性；

ê高利用率，未被利用的成分可降解为氨基酸被细胞利用；

ê高安全性，对细胞几乎无毒性，已在上百种细胞上验证。

实验流程图