由细胞向胞外空间释放的纳米级囊泡（EVs）是介导细胞间通讯中的关键角色，因此在多种生理和病理过程中具有重要意义。为了深入了解EVs功能和在相关疾病中扮演的角色，需要有效的分离和检测EVs的方法。
       传统EVs分离方法主要基于EVs的物理化学参数，缺乏时间分辨率的考量，即应激后新产生的EVs和应激前已存在的旧EV没有明确的理化性质差异，难以通过现有技术进行区分。缺乏实现准确检测EVs动态变化的有效方法，将极大地影响对其功能的深入解读。

       近日，研究人员展示了一种从时间维度上分离EVs的方法，有望为EVs分离分析和发现EVs标志物提供新方向。
       研究人员提出结合代谢聚糖标记和点击化学的微流控富集策略，简称“Melac-Chip”策略。通过在4T1乳腺肿瘤小鼠接受PD-L1抗体治疗的同时注射Ac4ManNAz进行葡萄糖代谢标记，使得小鼠体内新产生的EV携带叠氮标记；随后通过与DBCO-PEG4-Biotin共价反应后，带有生物素标记的新生EVs可以被链霉亲和素（SA）修饰的芯片选择性捕获。
       并且，研究人员证实非天然糖Ac4ManNAz可在EVs上标记叠氮官能团，对EV的理化特征和蛋白组分无显著影响。通过对肿瘤小鼠模型中分离到的叠氮EVs进行分析，他们揭示了PD-L1抗体免疫治疗后，新生的PD-L1+ EVs与肿瘤体积的正关系性远优于无时间区分的PD-L1+ CD63+EVs与肿瘤体积的相关性。

       综上，该研究开发了一种可以从时间维度上分离EVs的策略，不仅可以作为一种癌症治疗疗效的动态监控工具，还可用于更为广发的应激下EVs的动态研究，为深入理解EV功能提供了新的视角。