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400-021-2021
BV2 小鼠小胶质细胞
Mouse Microglia Cells ,bv-2

货号:iCell-m011(种属鉴定)

价格: 1500.0

规格: 1*10 6   

数量: +

细胞介绍

该细胞来源于德国DSMZ(German collection of microorganisms and cell cultures),源于C57BL/6小鼠小胶质细胞,表达核v-myc、染色体v-raf癌基因,表面表达envgp70抗原,在形态学、表型及功能上有吞噬细胞的特征。

细胞特性

1) 来源:小鼠脑

2) 形态:上皮细胞样 松散贴壁,悬浮和贴壁细胞混合生长

3) 含量:>1x106  细胞数

4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途:仅供科研使用。

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理

1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。

2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。

3)半贴细胞和贴壁不牢(悬浮)细胞:T25瓶置于37℃培养箱中约2-3h,显微镜下观察细胞的情况,若细胞密度在60%以下,客户需收集T25瓶中的悬浮细胞离心后用完全培养基重悬后打回到原培养瓶中继续培养,若细胞生长70%-90%对细胞进行传代,传代时需要收集培养基中悬浮的细胞离心后回收。

4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。                      

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备DMEM 基础培养基 (推荐:iCell-0001)         87%

      优质胎牛血清                                                           10%

      GlutaMAX-1谷氨酰胺    (推荐:iCell-0900 )         1%

      HEPES 1M Buffer solution  (推荐:iCell-01200)    1%

      P/S青霉素-链霉素                                                     1%.

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1)冻存细胞的复苏:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达70%-90%,即可进行传代培养。

该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞,传代可以参考以下方法:

1. 收集:将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3. 将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

下面T25瓶为例;

1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.

2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。

3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。


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         DMEM培养基

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             胎牛血清

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            P / S 双抗

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           PBS缓冲液

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            胰蛋白酶

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           细胞冻存液

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            细胞冻存管

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              细胞培养瓶

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             离心管

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               培养孔板

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                移液管

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            细胞培养皿

序号

产品名称

货号

规格

售价

备注

1

培养基1640

icell-0002

500ml

140

 

2

培养基DMEM

icell-0001

500ml

140

 

3

培养基DMEM/F12

icell-0005

500ml

140

 

4

内皮细胞培养基ECMsciencel

icell-0016

500ml

2280

 

5

动物上皮细胞培养基Epicm-a

icell-0015

500ml

1980

 

6

上皮细胞培养基Epicm

icell-0017

500ml

1980

 

7

Mccoy’s 5A 培养基

icell-0011

500ml

160

 

8

MEM培养基

icell-0012

500ml

140

 

9

FBS北美胎牛血清

GIBCO   16000-044

500ml

6800

 

10

FBS墨西哥胎牛血清

10437-028

500ml

5616

 

11

马血清

gibco.16050122

500ml

1489

 

12

DMSO

sigma-D2650

100ml

1520

 

13

PBS片剂(1000ml)

09-9400-100

100片

4170

 

14

PS双抗(进口)

15140-122

100ml

452

 

15

胰蛋白酶

25200-072

500ml

665

 


1. 售后服务告知书.pdf   下载
2. 细胞复苏、传代与冻存操作流程 -- .pdf   下载

参考文献:

【1】Chu Q, Jiang Y, Zhang W, et al. Pyroptosis is involved in the pathogenesis of human hepatocellular carcinoma[J]. Oncotarget, 2016, 7(51): 84658.

【2】Wang S, Zhang C, Li Y, et al. Anti-liver cancer effect and the mechanism of arsenic sulfide in vitro and in vivo[J]. Cancer Chemotherapy and Pharmacology, 2019, 83(3): 519-530.

注意事项

1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。

3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。

4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

5.客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打技术售后服务电话:021-60523091,我们随时给予解答。

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合作单位: