一、产品描述
别名 | NIB1; Ulp1; |
蛋白及NCBI编号 | Q02724、 NM_001183834.1 |
宿主 | E.coli |
表达区域 | 401-621aa |
蛋白长度 | 230aa(含标签) |
蛋白序列 | MKKLVPELNEKDDDQVQKALASRENTQLMNRDNIEITVRDFKTLAPRRWLNDTIIEFFMKYIEKSTPNTVAFNSFFYTNLSERGYQGVRRWMKRKKTQIDKLDKIFTPINLNQSHWALGIIDLKKKTIGYVDSLSNGPNAMSFAILTDLQKYVMEESKHTIGEDFDLIHLDCPQQPNGYDCGIYVCMNTLYGSADAPLDFDYKDAIRMRRFIAHLILTDALKLEHHHHHH |
分子量 | 约26.9kDa |
融合标签 | 6×His (C端) |
纯度 | ≥95% 蛋白电泳 |
物理性状 | 液态或冻干粉 |
复溶 | 储存液:推荐用PBS或者根据实验需要选定合适溶剂配成1mg/mL储存液,分装保存于-20℃。 工作液:客户可根据实验要求稀释,现配现用。工作液配置后可以4℃放置2-3周。 |
稳定性 | 在-20℃/-80℃条件下,液态产品保存6个月,冻干产品保存12个月。 |
应用 | 抗体制备,免疫实验(ELISA,WB),切割融合蛋白N端的SUMO标签等。 |
发货周期 | 1-2周,现货2-3天。 |
实验效果图
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12% Tris-Gly SDS-PAGE蛋白电泳图 |
二、运输和储存
2-8℃运输。从收到之日起,在-20℃至-80℃的无菌条件下保存。
三、背景信息
小分子泛素相关修饰蛋白(SUMO)是一类泛素相关的蛋白质,通过结合赖氨酸侧链来调节靶蛋白的功能。SUMO化是一个可逆的翻译后修饰过程,在真核细胞内发挥着极其重要的作用,如转录、DNA修复、DNA重组、信号转导、蛋白质核转质运输和调节细胞周期等。
近年来,SUMO已经成为一种有效的生物技术工具,通过SUMO与靶蛋白融合可以促进蛋白质折叠,增强蛋白质的可溶性表达,保护蛋白质免受蛋白酶水解,提高蛋白质的稳定性,已经成功表达了FGF21、EGF、KGF2等。且SUMO融合蛋白可以被SUMO蛋白酶Ulp1特异性识别并切割,因此SUMO可以作为用于蛋白质表达的理想标签。传统的蛋白酶如factor Xa、烟草蚀刻病毒蛋白酶(TEV)、肠激酶和凝血酶等常用于标签的切除,但传统蛋白酶识别特定的氨基酸序列,由于空间阻遏导致切割蛋白酶酶切效率不高。Ulp1与传统的切割酶不同,Ulp1识别SUMO三级结构,特异性的切割SUMO标签C端的异肽键。
迄今为止,已经切开了100种SUMO融合蛋白,未发现错误的剪切。更重要的是,SUMO融合蛋白切割后,靶蛋白的N端不含有多余的氨基酸。对于医药蛋白,先决条件是仅含有天然氨基酸序列,因此SUMO作为融合标签对医药蛋白的表达及纯化有重要的意义。
四、参考文献
1. Christopher M. Hickey, et al. Function and Regulation of SUMO Proteases. Nat Rev Mol Cell Biol. 2012 Dec; 13(12): 755–766.
2. Marina Y.Linova, et al. A novel approach for production of an active N-terminally truncated Ulp1 (SUMO protease 1) catalytic domain from Escherichia coli inclusion bodies. Protein Expression and Purification
3. Rong Cai, et al. SUMO-specific Protease 1 Regulates Mitochondrial Biogenesis through PGC-1α*. CELL BIOLOGY. 2012, 287(53): P44464-44470
4.Zachary C Elmore, et al. Sumo-dependent substrate targeting of the SUMO protease Ulp1. 2011, BMC Biology ,9(74).
5. Xu, Z, et al. Molecular basis of the redox regulation of SUMO proteases: a protective mechanism of intermolecular disulfide linkage against irreversible sulfhydryl oxidation. 2008, FASEB J, 22: 127-137
6. during the last decade. Eur Cytokine Netw, 1996,7(2):93-124.
本产品仅作科研用途。请穿实验服并戴一次性手套操作。
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