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HFL1 人胚肺成纤维细胞
Human Lung Fibroblasts ,HFL-1

货号:iCell-h017(STR鉴定)

价格: 1500.0

规格: 1*10 6   

数量: +

细胞介绍

正常胎儿肺成纤维细胞,核型正常,该细胞为有限细胞系,传至第七代时建立起的细胞系,正常情况下细胞可以稳定的传代至46代左右。

细胞特性

1) 来源:白人,胎儿

2) 形态:成纤维样,贴壁生长

3) 含量:>1x106 个

4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

6)用途:仅供科研使用。

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理:

1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。

2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。

3)贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞在1000RPM条件下离心5min,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中添加按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基培养。

4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。                   

细胞培养操作步骤

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F12K(推荐iCell-0007)培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度和拍照。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%血清的培养基来终止消化。

3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4 . 收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3)细胞冻存,收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

下面T25瓶为例;

1.细胞冻存时按照细胞传代步骤收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml

2.1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。

3.将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

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          F-12K培养基

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              胎牛血清

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            P / S 双抗

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             PBS缓冲液

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              胰蛋白酶

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              细胞冻存液

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              细胞冻存管

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                细胞培养瓶

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               离心管

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               培养孔板

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                   移液管

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              细胞培养皿


序号

产品名称

货号

规格

售价

备注

1

培养基1640

icell-0002

500ml

140

 

2

培养基DMEM

icell-0001

500ml

140

 

3

培养基DMEM/F12

icell-0005

500ml

140

 

4

内皮细胞培养基ECMsciencel

icell-0016

500ml

2280

 

5

动物上皮细胞培养基Epicm-a

icell-0015

500ml

1980

 

6

上皮细胞培养基Epicm

icell-0017

500ml

1980

 

7

Mccoy’s 5A 培养基

icell-0011

500ml

160

 

8

MEM培养基

icell-0012

500ml

140

 

9

FBS北美胎牛血清

GIBCO   16000-044

500ml

6800

 

10

FBS墨西哥胎牛血清

10437-028

500ml

5616

 

11

马血清

gibco.16050122

500ml

1489

 

12

DMSO

sigma-D2650

100ml

1520

 

13

PBS片剂(1000ml)

09-9400-100

100片

4170

 

14

PS双抗(进口)

15140-122

100ml

452

 

15

胰蛋白酶

25200-072

500ml

665

 

1. 售后服务告知书.pdf   下载
2. 细胞复苏、传代与冻存操作流程.pdf   下载
注意事项

1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。

3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。

4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

5.客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打技术售后服务电话:021-60523091,我们随时给予解答。

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合作单位: