货号：ipsMed-iCell-CA003              

储存条件：2 ~ 8 ℃

产品简介

iPS细胞消化液可以应用于非饲养层依赖的iPS传代，该工作液属于非酶类温和消化液，对细胞损伤小且消化时间适中便于操作，是一种已被普遍使用的消化液，可与iPS培养基搭配使用。

操作说明

1、消化前，准备 37 ℃预热好的无钙镁PBS 溶液及消化液，完全培养基。

2、吸走上清，并加入37℃预热好的PBS 溶液清洗1次。

3、加入适量（按 6 孔板每孔加 1mL，6cm 皿加 2mL，10cm 皿加 3mL 的量）的 37℃预热好的消化液。

4、37℃放置1-2min，用手指轻弹皿/板/瓶身，显微镜下观察到大部分克隆边缘开始脱离培养皿/板底，克隆内部大部分细胞成团脱落。

5、加入适量的完全培养基终止消化。

6、移入离心管，300g离心5min。

7、吸出培养基，确保细胞团完整。

8、然后缓慢加入1mL完全培养基，用手指轻弹离心管底部，使细胞团脱离底部并分散。

9、传代比例为 1：6—1：8，根据最终培养细胞的液体体积，加入ROCK inhibitor Y27632，终浓度为10μM。

10、将培养皿/板/瓶置于37℃培养箱中，每天更换培养基（换液不需要再添加Y27632，但培养基需提前预热）。

 注：

1.吹吸的力度要轻柔，吹打脱落和吹吸混匀的次数总共不超过10次为宜。吹打过度导致大量单细胞出现是造成细胞分化或死亡的重要原因。

2.若有少量细胞无法从皿底脱落，属于正常现象，需延长消化时间。