中文 / English 您是第 2229093 位访问者,欢迎您!
400-021-2021
首页  >  产品  >  细胞系  >  耐药株
LoVo/ADR 人结直肠腺癌细胞阿霉素耐药株(暂不提供)
Human Colorectal Adenocarcinoma Cells

货号:iCell-h246

价格: 1500.0

规格: 1*10 6   

数量: +

细胞特性
1) 来源:结直肠腺癌
2) 形态:上皮样细胞,贴壁生长
3) 含量:>1x10^6 个/mL
4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存

(1)使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。

(2)收到细胞后,可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐使用的培养基后转移至250px培(3)养皿或者T75培养瓶中培养,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。              
细胞培养步骤
一. 培养基及培养冻存条件准备:

注意:培养瓶里面的培养液是不含药物的,待细胞长到70-80%汇合度时,去掉培养液,加含500ng/ml阿霉素药物的培养液,放入培养箱,这段时间会有少部分细胞悬浮起来,属于正常情况,通过换液可以去掉,等细胞长满就可以消化传代了,这时可以一直用含药物培养基来培养细胞,两代之后就可以将药物浓度提高到1000ng/ml,细胞冻存时不要在培养基中加药物。
1) 准备F12K培养基(F12K,SIGMA,货号N3520,添加NaHCO3 2.5g/L),90%;优质胎牛血清,10%,添加1000ng/ml的阿霉素。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
 
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。

序号

产品名称

货号

规格

售价

备注

1

培养基1640

icell-0002

500ml

140

 

2

培养基DMEM

icell-0001

500ml

140

 

3

培养基DMEM/F12

icell-0005

500ml

140

 

4

内皮细胞培养基ECMsciencel

icell-0016

500ml

2280

 

5

动物上皮细胞培养基Epicm-a

icell-0015

500ml

1980

 

6

上皮细胞培养基Epicm

icell-0017

500ml

1980

 

7

Mccoy’s 5A 培养基

icell-0011

500ml

160

 

8

MEM培养基

icell-0012

500ml

140

 

9

FBS北美胎牛血清

GIBCO   16000-044

500ml

6800

 

10

FBS墨西哥胎牛血清

10437-028

500ml

5616

 

11

马血清

gibco.16050122

500ml

1489

 

12

DMSO

sigma-D2650

100ml

1520

 

13

PBS片剂(1000ml)

09-9400-100

100片

4170

 

14

PS双抗(进口)

15140-122

100ml

452

 

15

胰蛋白酶

25200-072

500ml

665

 


1. 售后服务告知书.pdf   下载
2. 细胞复苏、传代与冻存操作流程 -- .pdf   下载
注意事项

1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。

3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。

4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

5.客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打技术售后服务电话:021-34512991,我们随时给予解答。


合作单位: